Luciferase Reporter-Protokoll

Das Licht von Glühwürmchen ist ein wichtiges Instrument für Molekularbiologen geworden. Glühwürmchen Bio-Lumineszenz--produziert durch die Luciferase-Umwandlung von Luciferin zu Oxyluciferin--wurde zuerst identifiziert, gekennzeichnet und entwickelt in der Luciferase Reporter-Assay von Forschern an der University of California, San Diego, 1986.

Definitionen

Desoxyribonukleinsäure (DNA) dient als das genetische Material in Zellen. Eine Projektträger-Sequenz der DNA steuert die Expression eines Gens--eine Reihenfolge von DNA, die ein bestimmtes Protein produziert. Ein Plasmid enthält als ein separates Stück DNA ein Gen, z. B. Luciferase.

Methoden

Ein Wissenschaftler erstellt ein Plasmid, das ein Förderer und das Luciferase-Gen enthält. Dieses Plasmid transfected--eingeführt, biologisch, chemisch oder mechanisch--in einer tierischen Zelle und später diese Zelle defekt öffnen jeder Freigabe Luciferase produziert. Luciferin ist diese Zelle Mischung hinzugefügt, und die Menge an Bio-Lumineszenz produziert durch die Luciferase-Umwandlung von Luciferin zu Oxyluciferin wird gemessen. Kits und detaillierte Protokolle sind für diese Probe im Handel erhältlich.

Verwendet

Die Menge an Bio-Lumineszenz produziert in dieser Probe ist proportional zur Stärke des Projektträgers und dient daher als eine nützliche Methode für den Vergleich von verschiedener Veranstaltern. Dies ist wichtig in den industriellen Einstellungen, wie optimierte Promotoren die Menge des Proteins in der gleichen Zeitspanne produziert erhöhen könnte.